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色谱柱预防性保护与柱寿命延长的秘诀

点击次数:1110 发布时间:2018-04-25
  色谱柱预防性保护与柱寿命延长的秘诀
  通常,一根色谱柱在分析数千个样品之后性能仍然保持良好,但也有的色谱柱仅分析不多的样品后几乎就报废了。影响色谱柱寿命和其它问题的因素很多,而有些因素是操作者很难控制的,如果被分析的样品(如分析生物样品),怎么净化样品也是“脏”的,对于色谱柱的影响是非常大的。然而采取下列措施后,在多数情况下总能够人为地减少色谱柱上故障,达到延长寿命的目的。
  1、色谱柱预防及维护-加流路过滤器和保护柱
  流路过滤器紧靠进样阀后面,位于分析柱前。0.5μm烧结不锈钢片夹在死体积很小的套子中,挡住来源于样品和进样阀垫圈的微粒入柱。因为每个样品都过滤既费事又带来误差,样品量少过滤更困难,因此流路上装过滤器是比较省事的办法。也可以在流路加上保护柱,放在流路过滤器和分析柱之间,或者代替流路过滤器。保护柱的使命是收集阻塞色谱柱进口的来自样品的化学“垃圾”。这种垃圾zui终降低柱效能。保护柱是消耗品,分析50~100个比较脏的样品之后就要调换新的。保护柱应该是小体积,用分析柱的同种填料填装。保护柱使用得当,对分离无影响,好像未装保护柱一样。有些厂商的商品将保护柱和流路过滤器连在一个单元内,使用起来非常方便。自己填装保护柱都是用短柱、不超过3cm长,内径2~3mm,用较大粒度的填粒(15~20μm)干法填装,会使分析柱效略微有所降低。
  2、色谱柱预防及维护-避免高压冲击
  一般色谱柱都能经得起高压,但经不起突然变化的高压冲击。引起高压突然冲击,主要是因样品阀的缓慢转动、泵起动快、柱切换操作等。转动六通进样阀时从泵到柱的液流会瞬时切断。在阀的泵侧压力升高,在阀的柱侧压力降低(变化超过20%)。阀转到底后压力突然冲击一下恢复正常。手动进样阀的变化不大,自动进样阀比较慢,可能造成压力冲击,可用氦气代替空气驱动进样阀。因氮压缩系数小。另外泵起动不应过快,可分步操作。如用3mL/min流速,先从lmL/min到2mL/min,然后再3mL/min,每个间隔应大于20s。柱切换技术的应用也很广泛,切换过程中在色谱柱的入口处压力在零到很大数字之间变化,会很快使柱报废。
  

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