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让我们一起来了解一下进口色谱柱都有哪些操作和保养
点击次数:1218 发布时间:2019-03-22
色谱柱由柱管、压帽、卡套(密封环)、筛板(滤片)、接头、螺丝等组成。柱管多用不锈钢制成,压力不于70 kg/cm2 时,也可采用厚壁玻璃或石英管,管内壁要求有的光洁度。为提柱效,减小管壁效应,不锈钢柱内壁多经过抛光。也有人在不锈钢柱内壁涂敷氟塑料以提内壁的光洁度,其效果与抛光相同。还有使用熔融硅或玻璃衬里的,用于细管柱。色谱柱两端的柱接头内装有筛板,是烧结不锈钢或钛合金,孔径0.2~20μm(5~10&μm),取决于填料粒度,目的是防止填料漏出。
进口色谱柱管头死体积和柱外体积,无泄露密封。色谱柱管接头由三部分组成: 内接头,连接柱管和系统,固定筛板到色谱柱端,后螺帽固定内接头和柱体. 金属圈 固定色谱柱管接头和柱体。
进口色谱柱在吸附样品时,样品中所含有的盐、脂质、疏水蛋白质和其它一些生物物质都有可能与色谱柱发生相互作用,一些保留值较小的物质如盐类比较容易被冲出色谱柱,而另一些保留性较的组分,流动相溶液不足以把这些物质洗脱下来,多次上样后,这些吸附在柱子表面的物质通常就会积累在柱头。
进口色谱柱操作步骤:
1.平衡开始时将流速缓慢地提,用流动相平衡色谱柱直到获得稳定的基线(缓冲盐或离子对试剂流速如果较低,则需要较长的时间来平衡)
2.如果使用的流动相中含有缓冲盐,应注意用纯水”过渡”即每天分析开始前必须用纯水冲洗30分钟以上再用缓冲盐流动相平衡; 分析结束后必须用纯水冲洗30分钟以上除去缓冲盐之后再用甲醇冲洗30分钟保护柱子。
色谱柱的维护:
1.尽量能够使用预柱或保护柱保护色谱柱;
2.大多数色谱柱的PH范围是2—8,尽量不要过范围使用;
3.避免流动相的组成或比例急剧变化;
4.流动相使用前必须进行过滤和脱气处理;
5.如果使用性或粒子性的缓冲液作流动相,实验完毕后应将色谱柱冲洗干净。
随着经济的发展,多实验室用户开始追求实验更,除了从购买精尖仪器来提之外,更多实验室负责人开始意识到平时进口色谱柱设备的维护和保养的重要性,只有仪器*运行,才能切实做到提实验室效率。