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色谱柱有没有寿命过短究竟是为什么

点击次数:559 发布时间:2019-06-11
    您在日常的实验过程中用的色谱柱有没有寿命过短的问题?不但实验成本攀升,实验效果都没法保证。我们今天就为您解答有关色谱柱使用寿命的相关问题,助您的柱子“益寿延年”!
    为什么检测该项目使用不同品牌的色谱柱,寿命均在100针左右?
    1)可能的原因是样品组分吸附在色谱柱的前段。可能是由于样品在流动相中的溶解度低而沉淀出来的,也有可能是强吸附,或是样品本身与填料表面发生微弱的不可预知的化学反应。样品溶液本身的pH值在色谱柱的耐受临界值附近,而且进样体积较大(内径4.6mm,上样体积在50ul以上)对柱头端的填料影响比较大,通常这样的情况伴随柱压升高。
    解决方法:选择合适的样品前处理技术,去除掉强保留物质。使用保护柱,尽量选择与分析柱同种填料,同种键合方法的保护柱。如果使用不同品牌的填料、装填工艺的保护柱,在分离能力和保护分析柱方面可能得不到更好的效果。也不要使用更大粒径的保护柱,更大粒径或者装填较差的保护柱会因为它的峰展宽作用而导致分离能力下降。
    2)键合相脱落变性。色谱条件多方作用导致寿命短,这是目前的色谱技术不能解决的,一般情况下小基团键合相更容易被水解而脱落。流动相中盐浓度越高,越容易引起水解。这种情况下,就只能重新开发色谱条件。
    为什么该品牌的色谱柱一直很好,就这一支寿命异常短?
    确定一下使用频率、冲洗频率、流动相的更换频率、流动相的试剂品牌、纯度等是否和之前一样,如果有更换,那寿命有差异是正常现象。如果都与之前相当,那需要检查这支色谱柱是否受过剧烈震荡,比如:不小心摔过,或者运输过程中受过剧烈震荡,建议与厂家的技术人员沟通。
    为什么使用该品牌的支色谱柱用于方法建立时寿命长,方法建立后,开始进行方法验证时,却觉得寿命短?
    这种情况的发生,很大的原因是,前期建立方法时,并不是连续做项目,而是不停地更换流动相。这就意味着色谱柱的冲洗频率比较高,而更换的流动相的清洁度也是比较好的。建立方法的时候很难连续进样多次,有时候甚至一周才做一次项目,这样就会产生支柱子使用时间更久的错觉。而方法建立后,做方法验证,流动相固定下来,就会一次性配置较大体积的流动相,这样流动相较易变质,有时肉眼不能直接分辨。而且会连续多次过夜进样,这样对色谱柱的冲洗也不是很及时。这些都是可能导致色谱柱寿命变短的因素。

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