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高效液相色谱仪常见故障及解决方案

点击次数:753 发布时间:2021-01-13
  高效液相色谱仪常见故障及解决方案
  液相色谱仪在使用的过程中,可能会出现的故障:
  1、流动相脱气不充分;
  2、流动相供给不畅;
  3、流动相和贮液器被污染。
  常见故障解决方案:
  1、流动相脱气不充分,对流动相进行再脱气,采用更有效的脱气方法(如通氮气保护)或两种方法配合使用,改变系统内混合为系统外低压预混合。
  2、流动相供给不畅,可能的原因是流动相已接近用完,管路吸入气体引起泵压力不稳,应经常观察贮液器中流动相的量,加足流动相的量保证所有的样品分析完毕;输液管路上安装沉子沉至瓶底,贮液器盖上留一小孔正好夹住进液管,使其不能上下移动;过滤器阻塞会引起管道和泵腔空化,也会使压力不稳;当过滤器被微粒所阻塞或长霉时,去掉过滤器后系统会运转正常,换上新过滤器即可;如果换上新过滤器仍然不畅,那就需要检查流动相的制备过程,或者换大孔径的过滤器,流动相都要重新过滤。流速过高、阻力大,造成空化现象,这是由于过滤器孔径、管道内径、流速和溶剂黏度等引起的。出现这种情况时,可尝试用下列方法解决:
  1)改用低流速;
  2)换大孔径的过滤器;
  3)增加进液管路内径;
  4)抬高或加压贮液器;
  5)临时不用入口过滤器(流动相确保做好过滤);
  其它问题,包括渗漏或接头松动、低压混合器过滤器阻塞、泵部件损坏(密封垫等),都能引起流动相供液不正常,注意检查排除。
  3、贮液器或流动相被污染,会出现一些问题:产生有规则的噪音增大、检测器基线上升等现象。流动相中的污染物可能会被泵以稳定的浓度打入系统,而后再以稳定的浓度流出来,所以在色谱图中不出多余的峰。
  不干净的贮液器会污染清洁的流动相,每种流动相要备有的贮液器,或者定期报废贮液器,都是良好的工作习惯。流动相污染源来自这几个方面:试剂质量不高,玻璃器皿不合格,微生物的影响,配制流动相时操作不当等,因此要求用高纯度化学试剂和HPLC级溶剂,一旦发现试剂有问题应坚决报废掉。
  玻璃器皿应按规定清洗干净,为防止生长微生物,每天要按前述的方法清洗系统;怀疑系统内生长了微生物时,可用稀硝酸冲洗(注意不要损坏柱和管路系统),在缓冲液内加生长抑制剂(0.04%叠氮钠)或冷藏缓冲液;每天用0.2μm的过滤器过滤缓冲液,也会有效地防止微生物污染系统;真空脱气时要防止泵油带入流动相;应该用清洁的惰性塞子、搅捧、过滤器和玻璃器皿配制流动相;已经污染的色谱仪流动相一定要废弃掉。

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