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液相色谱仪的原理是利用不同待分离物质在两相中的亲和力差异
点击次数:1121 发布时间:2021-05-08
液相色谱仪的原理是利用不同待分离物质在两相中的亲和力差异,如分配系数、吸附容量等。利用外力,含有样品的流动相(气体、液体)通过固定在柱或平板上的固定相表面,该固定相与流动不相溶。当流动相中携带的混合物流经固定相时,混合物中的组分与固定相相互作用。
液相色谱法只要求样品能制成溶液,不受样品挥发性的限制,流动相可选择的范围宽,固定相的种类繁多,因而可以分离热不稳定和非挥发性的、离解的和非离解的以及各种分子量范围的物质。与试样预处理技术相配合,HPLC所达到的分辨率和灵敏度,使分离和同时测定性质上十分相近的物质成为可能,能够分离复杂相体中的微量成分。随着固定相的发展,有可能在充分保持生化物质活性的条件下完成其分离HPLC成为解决生化分析问题zui有前途的方法。由于HPLC具有分辨率、灵敏度、速度快、色谱柱可反复利用,流出组分易收集等点,因而被应用到生物化学、食品分析、医药研究、环境分析、无机分析等各种领域。液相色谱仪与结构仪器的联用是一个重要的发展方向。液相色谱-质谱连用技术受到普遍重视,如分析氨基甲酸酯农药和多核芳烃等;液相色谱-红外光谱连用也发展快如在环境污染分析测定水中的烃类,海水中的不挥发烃类,使环境污染分析得到的发展。
为了液相色谱仪使用的稳定性,我们对于设备使用环境是有一定要求的,包括:通风、照明、供电、环境温度和湿度以及洁净度,其中:
1、通风:使用液相色谱仪分析过程中,由于流动相中含有挥发性有机溶剂(甲醇、乙睛等)会产生有害气体,对仪器中的光学元件带来腐蚀,应注意仪器室的通风,以排除室内有害气体、保持空气清。通风主要有两种方式:一种自然通风,定时打开门窗,让内外空气对流;另一种是制通风,如用通风柜、排风扇等,及时将有害气体排出室外。
2、照明:室内照明要光线适中,避免阳光直射。为避开直射光线对仪器操作、观测的影响,仪器(显示屏)应侧向光线。实验室窗户要挂窗帘,以便随时调节光照度。
3、供电:液相色谱室应设有照明电源和动力电源,动力电可供仪器运行使用。为减少噪音的干扰,仪器应远离瞬时供电的大功率电器设备,如大型电动设备、电梯、空调系统等。为HPLC泵的晶度,必须要稳定的输人电压,为此,建议色谱室应设有和仪器负荷相当的稳压电源。
4、环境温度和湿度:适宜的温度和湿度是保障HPLC仪正常运行、性能稳定的必要条件。一般要求室温在20一30℃之间,日温度变化2一3℃,不要波动太大,否则,在开机分析时会影响色谱分离,夏季一定要控制室温不要过30℃,温度太会使流路系统产生气泡,影响检测器的正常工作(如荧光检测器)。室内相对湿度应控制在60%以下。
5、洁净度:悬浮于空气中的颗粒物质会对色谱仪器分析带来干扰,使本底和噪声升,成为分析测试的污染源,直接影响纯物质的纯度与痕量杂质的分析。
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