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液相色谱柱的柱长及内径的选择原则是什么

点击次数:614 发布时间:2021-07-21
  液相色谱柱是由柱管、压帽、卡套(密封环)、筛板(滤片)、接头、螺丝等组成。柱管的材质有很多,比如聚合物、玻璃、不锈钢等。但是建议柱管用不锈钢材质,因为不锈钢这种金属耐高压、耐腐蚀且硬度高,相比于玻璃等材质不易摔坏。不过当压力不高于70Kg/cm2时,也可采用厚壁玻璃或石英管。对于液相色谱柱柱管内壁要求有很高的光洁度,不锈钢柱内壁会经过多次抛光,这是为提高柱效,减小管壁效应。0.1μm高光洁度色谱柱柱管能够快速分析的同时保持超高的柱效;使用寿命长,不仅能够减少频繁更换色谱柱带来的重新进行方法验证、条件摸索等工作,还大大的降低了使用成本;具备优良的选择性和分离能力。
  除了抛光,也有在不锈钢柱内壁涂敷氟塑料来提高内壁的光洁度,其效果与抛光是相同的。色谱柱两端的柱头内装有筛板,通常是不锈钢和peek材质制作的,根据需求选择与色谱柱匹配的柱筛板,孔径取决于填料粒度,目的是防止填料漏出。
  柱内径一般是根据柱长、填料粒径和折合流速来确定,目的是为了避免管壁效应。
  液相色谱柱的柱长及内径的选择原则是什么?长度的选择:柱越长,总柱效越高(n值越大),柱越长,分析时间也越长。250—300mm是普遍的柱长,实验室一半以上的工作都是采用此规格柱子,一般用来分离l0到50个组份的中等至复杂混合物;500—600mm,要求较高分辨率的应用,—般用来分离大于50个组份或包含有难分离物质的复杂样品程序升温分析。
  内径:柱效率与柱半径平方成反比,内径越小柱效越高,但内径越大,柱容量也增加,允许进样量就越多。当进样量超过柱容量时,则因柱内每块理论板内不能建立真正的平衡,将会导致色谱峰畸变,柱分辨率降低,重现性不好。因此对于复杂样品需要准确分离,必须使用小内径柱子。另一方面若样品中存在具有很不相同浓度组份化合物,为了增加样品容量就必须使用内径大的柱子,目前实验室使用常见的柱子内径一般是4.6mm。
  分析大分子量化合物选择大孔径色谱柱;对于高pH值或者碱性化合物需要选择高封端或者特殊封端的色谱柱,以改善峰形,延长色谱柱使用寿命等。恒谱生液相色谱柱内径有2.1、3.0、4.6、10mm可供选择,不锈钢材质不易因为磕碰损坏柱管。

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