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想让色谱柱用的久,得“好好用”才行!

点击次数:805 发布时间:2021-07-21
  大家都知道一根色谱柱是比较昂贵的,作为一个色谱耗材,当然是让色谱柱使用寿命尽量延长以降低成本。而影响色谱柱的使用寿命的因素大多的使用时的操作不当导致损坏色谱柱。想让色谱柱用的久,得“好好用”才行!
  使用前,做好这三个阶段的操作注意事项:
  一、使用前准备:
  因为生物的复杂性,样品纯化程度越高,色谱柱的使用寿命就越长,因此样品的预处理是十分重要的。比如溶剂的选择、样品过滤等。我们可以选择色谱专用的纯水作为溶剂,并且使用溶剂进样口过滤器再过滤一次杂质、颗粒物等,这样能更加“纯净”,对延长色谱柱的使用寿命有很大的帮助作用。
  吸滤头
  使用色谱柱前还要考虑其他的影响因素,如分析物的某些性质同样能影响色谱柱的使用寿命。强酸、强碱性物质和蛋白质类生物大分子,它们能与固定相填料作用,或生成不可逆吸附层,改变填料表面特征,使色谱柱性能发生变化,最终导致分离失效。
  二、使用过程中:
  避免机械冲击,如果泵启动太快,流速和柱压的瞬间升高,柱床受到冲击,会造成色谱柱损坏;
  利用柱箱保持柱温恒定,高于柱温承受的范围,会增加对流动相中化学物质的吸附,还可能改变峰形,降低柱效,造成不可逆性的损伤。
  逐渐改变工作流量和压力,切勿进行突然更改。流速过大,压力升高,会引起色谱填料冲垮、塌陷。
  在适宜的pH范围内运行,以硅胶作基质的固定相一般要求pH在2.5~7范围内使用。长期在pH>7或pH<2使用环境中,硅胶会逐渐溶解或者表面键合的官能团会逐渐流失。
  避免进行大体积的进样导致色谱柱超载,不要过度用力拧色谱柱,可能会造成损坏。
  三、使用后的清洗与储存:
  色谱柱使用后要注意清洗,用较强的流动相冲洗,如果还是无法清洗干净,可以采用更强的洗脱剂清洗。
  色谱柱清洗完毕后,绝对不要将色谱柱存储在冰箱或热风烤箱中,这可能导致固定相不可逆转的损坏。使用前后轻拿轻放,注意不要磕碰或者用力撞击导致损坏。
  即使在采取了建议的预防措施之后,由于色谱柱的使用寿命有限,其性能也会受到影响。您应该定期注意色谱柱的性能,并采取有效措施观察峰形的下降,保留时间的变化,分离度差或出现不需要的峰。

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