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如何判断是色谱柱出现问题导致双峰出现呢

点击次数:464 发布时间:2021-12-28
  明明实验时只分析一种物质,为什么峰图会出现双峰呢?通常情况下,正确的峰型应该是尖锐而对称的,出现双峰应该是实验过程中有错误的步骤导致的。液相色谱出现“双峰”的原因有很多。一般有以下几种原因:色谱柱、溶剂、进样量、样品特性和pH值。简单介绍其中色谱柱、溶剂因素导致出现双峰及解决办法。
  如何判断是色谱柱出现问题导致双峰出现呢?操作人员分析单一纯物时,如果每个色谱峰都出现双峰,可以确定是色谱柱头受损或者是柱头污染了。如果是色谱柱正常,进样量少并且色谱峰形为一大峰带一小峰,不一定拖尾,这种情况可能是柱头受堵。可以将色谱柱反过来接,用流动相或其它溶剂冲洗掉堵在柱头的残留物,然后再反过来,一般都能解决。如果反复还是不能解决问题,可能是柱头塌陷的问题。液相色谱柱寿命在正确使用时可达2年以上,但是柱子使用一段时间后,可能有一些吸附作用强的物质保留于柱顶造成柱头塌陷,这时可补加填料使柱效恢复。每次使用完色谱柱后,需用洗脱能力强的洗脱液冲洗,以延长色谱分析柱的寿命。
  色谱柱头塌陷的原因有很多,比较常见的是色谱泵压力过高,填料压碎产生空隙。除此之外还有诸如装填时压力过低,不密实;流动相溶解填料,造成空隙;色谱柱入口筛板堵塞等原因。色谱筛板能有效地拦截样品、流动相或管线及密封件的颗粒物对色谱柱的污染,保护色谱柱和仪器。筛板使用一段时间后,拦截的污染物会堵塞筛板,因此需要定期更换。但是相较于损坏色谱柱,更换一个筛板显得性价比更高,成本更低廉。
  溶剂问题
  反相色谱流动相多为甲醇、乙腈、水,实验中往往会从中加各种添加剂以改善分离性能。有时候为了样品的溶解性或稳定性加入了一点的缓冲液,但是缓冲液的酸碱性可能会导致样品转化,从而产生双峰现象。可以更换缓冲液或者更换流动相试一试。
  影响双峰出现的原因还有很多,比如样品超过柱载量,从而导致二次分配;仪器间隔记录时间太短都有可能造成双峰出现。因此具体情况要具体分析,以上仅供各位色谱工作者参考。

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