—— PROUCTS LIST
外标法检测样品中柚皮苷含量
一、实验方法
Cometro液相色谱系统;
色谱柱:Comasil C18 250*4.6mm,5μm;
流动相:甲醇-水=40:60;
紫外检测器波长:283nm;
流速:1.0ml/min;
样品:柚皮苷对照品(19.68μg/ml),样品;
进样量:对照品分别进样2.5μl、4μl、5μl、6μl、7.5μl各5次,样品进样5μl,使样品与标准品5:1混合再进样5μl,考察线性相关性,保留时间重现性,峰面积重现性,回收率。
二、实验结果与分析
1、对照品5μl
Channel A Results | |||||
Name | Retention Time | Area | Theoretical plates (USP) | Resolution (USP) | Asymmetry |
柚皮苷 | 18.477 | 89103 | 8137 | 0.00000 | 1.09209 |
附进样量,保留时间,峰面积关系表:
进样量/μl | 保留时间/min | 峰面积/mV*min |
2.5 | 18.386 | 42387 |
4 | 18.377 | 71244 |
5 | 18.477 | 89103 |
6 | 18.539 | 106504 |
7.5 | 18.501 | 134769 |
2、样品5μl
Channel A Results | |||||
Name | Retention Time | Area | Theoretical plates (USP) | Resolution (USP) | Asymmetry |
柚皮苷 | 19.497 | 128002 | 8087 | 5.22515 | 1.05546 |
3、样品与标准5:1混合后进样5μl
Channel A Results | |||||
Name | Retention Time | Area | Theoretical plates (USP) | Resolution (USP) | Asymmetry |
柚皮苷 | 18.535 | 120336 | 7828 | 2.87114 | 1.03257 |
三、结果运算
1、保留时间重现性考察
保留时间 | 18.386 | 18.377 | 18.477 | 18.539 | 18.501 |
RSD | 0.3747% |
2、峰面积重现性考察
峰面积 | 89103 | 89105 | 88953 |
RSD | 0.0979% |
3、线性相关性考察及样品含量计算
以进样量为横坐标,峰面积为纵坐标,得线性方程:
由此可算出样品含柚皮苷28.08μg/ml。
4、回收率考察:
根据上面线性方程可算出混合后样品含柚皮苷26.43μg/ml,而实际真值是26.68μg/ml,因此得回收率为99.06%。
四、综述
此四项考察综合考察了检测器的吸收稳定性,泵的流量性,进样阀、进样针的性,Comasil色谱柱的性。