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外标法检测样品中柚皮苷含量

点击次数:1794 发布时间:2013-05-24

一、实验方法

Cometro液相色谱系统;

色谱柱:Comasil C18 250*4.6mm5μm

流动相:甲醇-=40:60

紫外检测器波长283nm

流速:1.0ml/min

样品:柚皮苷对照品19.68μg/ml,样品;

进样量:对照品分别进样2.5μl4μl5μl6μl7.5μl5次,样品进样5μl,使样品与标准品5:1混合再进样5μl,考察线性相关性,保留时间重现性,峰面积重现性,回收率。

二、实验结果与分析

1对照品5μl

Channel A Results

Name

Retention Time

Area

Theoretical plates (USP)

Resolution (USP)

Asymmetry

柚皮苷

18.477

89103

8137

0.00000

1.09209

 

附进样量,保留时间,峰面积关系表:

进样量/μl

保留时间/min

峰面积/mV*min

2.5

18.386

42387

4

18.377

71244

5

18.477

89103

6

18.539

106504

7.5

18.501

134769

 

 

2样品5μl

 

Channel A Results

Name

Retention Time

Area

Theoretical plates (USP)

Resolution (USP)

Asymmetry

柚皮苷

19.497

128002

8087

5.22515

1.05546

 

3样品与标准5:1混合后进样5μl

 

Channel A Results

Name

Retention Time

Area

Theoretical plates (USP)

Resolution (USP)

Asymmetry

柚皮苷

18.535

120336

7828

2.87114

1.03257

 

 

三、结果运算

1保留时间重现性考察

保留时间

18.386

18.377

18.477

18.539

18.501

RSD

0.3747%

 

2峰面积重现性考察

峰面积

89103

89105

88953

RSD

0.0979%

 

3线性相关性考察及样品含量计算

以进样量为横坐标,峰面积为纵坐标,得线性方程:

由此可算出样品含柚皮苷28.08μg/ml

4回收率考察:

根据上面线性方程可算出混合后样品含柚皮苷26.43μg/ml而实际真值是26.68μg/ml,因此得回收率为99.06%

四、综述

此四项考察综合考察了检测器的吸收稳定性,泵的流量性,进样、进样针的性,Comasil色谱柱的性。

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