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死体积对柱效的影响

点击次数:10661 发布时间:2012-03-30

 

我们可以设想这样一个场景,在一条湍急的河流中倒入一瓶墨水,墨水首会是一个小小的点,渐渐顺水流而行一点点扩散,而到下游的时候肯定已不再是一个点,而是一个宽宽的谱带了。这个现象*适用于HPLC的分析,试想样品由进样器起步为一个小小的点,流经管路和色谱柱,当到达检测池时必然也像墨水一样不可避免的有扩散,如果扩散小那么色谱图中峰宽就小,扩散大峰宽也大。为了得到较小的理想峰宽,我们就不得不讨论到一个常见的术语——死体积。
液相中的死体积,是指不被固定相滞留的组分,从进样到其出现zui大峰值时,所消耗流动相的体积。死体积包括三个部分:进样器至色谱柱管路及色谱柱出口管路的体积;色谱柱内固定相颗粒间的间隙(被流动相所占据,Vm);的体积;检测器流动池的体积。本文中重点讨论系统管路对色谱峰宽的影响。
就像小河一样,如果河流窄的话,墨水肯定扩散就小,同样,液相系统管路细,扩散就小。那么管路的粗细到底对谱图的结果有多大的影响,笔者在长期检验色谱柱柱效的工作中有过这样的经历:把进样器到色谱柱这一段管路,内径由0.25mm更换成0.5mm,笔者发现本来柱效合格的色谱柱变的远远低于合格标准,即由80000N/m的柱效下降到了50000N/m,如下图,峰展宽明显。

 

而0.5mm在液相色谱系统中其常见,一般多用于压泵出口到进样器这一段,可以降低系统压力。而进样器之后则尽可能选择较细的管路。
因此,为避免柱效降低及峰展宽的发生,应尽量减少连接管路的长度,缩小连接管路的直径,减少系统中的死体积。
上面都为笔者工作中小小心得,有不科学的地方希望同行能给予指正,共同进步。
 

 

 

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